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　地塞米松在诱发先天性腭裂发病中      

发表时间：2007-1-13 8:26:00

更多保健方面的文章请到中国保健网>>     摘　要：目的　检测地塞米松诱发nih小鼠先天性腭裂时对表皮生长因子受体(egfr)表达的影响。方法　在gd1212天小时给怀孕小鼠腹腔注射磷酸地塞米松注射液(50mg/kg)，对照组则以等量生理盐水代替。分别于gd1312、gd1412、gd1512天小时取出胎鼠头部标本，作冠状位切片。采用免疫组化方法检测胚胎腭中egfr的表达。结果　egfr的表达随胚胎腭的发育而增高，实验组egfr增高的速度较慢。结论　地塞米松诱发先天性腭裂发病与egfr表达的改变有关。　　先天性腭裂是口腔颌面部常见的先天性畸形，发病率高。尽管在临床上对于这种发育畸形的序列治疗已日趋完善，但该病发病机理尚不清楚。　　胚胎腭的发生发育是一系列连续、复杂的生物学过程，在这一系列复杂的过程中，需要激素、第二信使、生长因子等参与生命活动信号的传递。brunet等发现［1］，体外培养的腭器官中，125i-egf的结合位点广泛存在，并随着腭器官的发育而发生时空性改变。abbott和shiota曾报道表皮生长因子受体(egfr)在胚胎腭发育过程不同时期会发生改变［2，3］。这些结果提示egfr在胚胎腭发育中具有重要作用。本研究采用免疫组化方法检测胚胎腭发育过程中egfr的表达变化以及地塞米松对其表达的影响，探讨egfr在小鼠胚胎腭发育及先天性腭裂发病中的作用。　　1　材料与方法　　1.1　实验材料　　6～8周龄体重25～30g雌性nih小鼠60只，随机分为对照组及实验组，每组30只。兔抗小鼠egfr抗体，boster公司产品。s-p免疫组化染色试剂盒，santa公司产品。dab显色试剂盒，santa公司产品。　　1.2　标本制备　　经与雄鼠交配后，如发现阴栓，认为雌鼠已受孕，记为gd00天小时(gestation day，gd)。实验组在gd1212天小时腹腔注射磷酸地塞米松(50mg/kg)［4］，对照组以同等量生理盐水代替。分别于gd1312、gd1412、gd1512天小时颈椎脱位处死母鼠，每组各为5只，剖腹取出胎鼠，切取胎鼠头部。标本经4%多聚甲醛固定24h后，序列酒精脱水，石蜡包埋。以麦克尔氏软骨为基准面，作冠状位4～5μm厚连续切片，h-e染色，脱水，封片，光镜观察。　　1.3　免疫组化染色　　用s-p方法进行免疫组化染色，主要步骤如下：切片脱蜡至水，置3%h2o2中浸泡10min以消除内源性过氧化物酶，正常山羊血清37°c孵育20min以降低非特异性着色。适当稀释的兔抗小鼠egfr抗体37°c孵育2h，生物素化的二抗作用20mi共有3条文章 页次：1/3分页：9 1 2 3 8 :

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