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机械压力对大鼠下颌髁突软骨细胞
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发表时间:2007-1-13 8:26:00
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摘要 目的:建立体外培养细胞加力装置,在细胞水平探讨机械力作用下大鼠髁突软骨细胞功能代谢的变化。方法:采用流式细胞术检测不同时段、不同力值的机械压力对体外培养的大鼠髁突软骨细胞增殖活性的影响。结果:在一定时间、0~2.03×10-4 pa(0~207 g/cm2)力值范围内,随着机械压力的增大,受压的下颌髁突软骨细胞增殖活性增高,以持续压力作用6 h最为明显;当持续压力作用于下颌髁突软骨细胞24 h后,细胞增殖活性则出现下降。结论:在一定时间、一定力值范围内,随着机械压力的增大,受压的下颌髁突软骨细胞增殖活性有逐渐增高的趋势;当持续压力作用超过一定的范围,细胞增殖活性则出现下降趋势。 生物力对骨骼的生长发育有重要意义,在颌面矫形治疗中压力和张力常被应用来矫正颌面的骨骼畸形[1]。大量体内研究表明,功能矫形前伸下颌后,使颞下颌关节的生物力学和生物学环境发生改变,使下颌髁突软骨局部的激素和生长因子(雌激素、igf-ⅰ等)含量增高,刺激髁突软骨细胞增生活跃,促进髁突及下颌骨的生长[2,3]。但体内研究全身及局部的影响因素太多,无法明确下颌髁突软骨细胞本身在矫形治疗中发生的结构、功能及代谢的变化,因此,本实验在已建立了大鼠下颌髁突软骨细胞体外培养模型基础上[4],使用了一种简单易行的体外培养细胞的加力装置,采用流式细胞术(flow cytometry,fcm)检测不同力值的机械压力对体外培养的大鼠下颌髁突软骨细胞dna含量及细胞周期的影响,并进一步分析研究机械力对下颌髁突软骨细胞增殖活性的影响,为深入阐明颌面功能矫形治疗的细胞学机制提供可靠的实验依据。 1 材料和方法 1.1 实验材料 原代培养的大鼠下颌髁突软骨细胞[4];细胞加力装置:该装置由100 ml玻璃注射器制成,注射器针筒内径约为36 mm,底面积约为10.17cm2,活塞重量为105 g,将直径35 mm的细胞培养皿平放入针筒底部,再将活塞放入针筒,并密闭针筒下端,施加外力的砝码置于活塞顶部(图1);碘化丙啶染液:含碘化丙啶10 μg/ml,rna酶 10μg/ml,triton x-100 1.0%;流式细胞仪:美国coulter公司elite esp型,光源为氩离子激光发生器,发射波长488 nm,输出率15 mw。 图1 细胞施压力装置示意图 a 针筒, b 活塞, c 支架, d 细胞培养皿, e 砝码 1.2 方法 将原代培共有6条文章 页次:1/6分页:9 1 2 3 4 5 6 8 :
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