相关口腔诊所

　地塞米松在诱发先天性腭裂发病中      

发表时间：2007-1-9 9:53:00

更多保健方面的文章请到中国保健网>>      摘　要：目的　检测地塞米松诱发nih小鼠先天性腭裂时对表皮生长因子受体(egfr)表达的影响。方法　在gd1212天小时给怀孕小鼠腹腔注射磷酸地塞米松注射液(50mg/kg)，对照组则以等量生理盐水代替。分别于gd1312、gd1412、gd1512天小时取出胎鼠头部标本，作冠状位切片。采用免疫组化方法检测胚胎腭中egfr的表达。结果　egfr的表达随胚胎腭的发育而增高，实验组egfr增高的速度较慢。结论　地塞米松诱发先天性腭裂发病与egfr表达的改变有关。 　　先天性腭裂是口腔颌面部常见的先天性畸形，发病率高。尽管在临床上对于这种发育畸形的序列治疗已日趋完善，但该病发病机理尚不清楚。 　　胚胎腭的发生发育是一系列连续、复杂的生物学过程，在这一系列复杂的过程中，需要激素、第二信使、生长因子等参与生命活动信号的传递。brunet等发现［1］，体外培养的腭器官中，125i-egf的结合位点广泛存在，并随着腭器官的发育而发生时空性改变。abbott和shiota曾报道表皮生长因子受体(egfr)在胚胎腭发育过程不同时期会发生改变［2，3］。这些结果提示egfr在胚胎腭发育中具有重要作用。本研究采用免疫组化方法检测胚胎腭发育过程中egfr的表达变化以及地塞米松对其表达的影响，探讨egfr在小鼠胚胎腭发育及先天性腭裂发病中的作用。 　　1　材料与方法 　　1.1　实验材料 　　6～8周龄体重25～30g雌性nih小鼠60只，随机分为对照组及实验组，每组30只。兔抗小鼠egfr抗体，boster公司产品。s-p免疫组化染色试剂盒，santa公司产品。dab显色试剂盒，santa公司产品。 　　1.2　标本制备 　　经与雄鼠交配后，如发现阴栓，认为雌鼠已受孕，记为gd00天小时(gestation day，gd)。实验组在gd1212天小时腹腔注射磷酸地塞米松(50mg/kg)［4］，对照组以同等量生理盐水代替。分别于gd1312、gd1412、gd1512天小时颈椎脱位处死母鼠，每组各为5只，剖腹取出胎鼠，切取胎鼠头部。标本经4%多聚甲醛固定24h后，序列酒精脱水，石蜡包埋。以麦克尔氏软骨为基准面，作冠状位4～5μm厚连续切片，h-e染色，脱水，封片，光镜观察。 　　1.3　免疫组化染色 　　用s-p方法进行免疫组化染色，主要步骤如下：切片脱蜡至水，置3%h2o2中浸泡10min以消除内源性过氧化物酶，正常山羊血清37°c孵育20min以降低非特异性着色。适当稀释的兔抗小鼠egfr抗体37°c孵育2h，生物素化的二抗作用20min，三抗作用20min，dab显色3min，苏木素复染。以购自北京中山公司的阳性片作为阳性对照，pbs代替一抗作为阴性对照。 　　1.4　图像处理 　　光镜观察染色结果，选取阳性染色切片经电视摄像系统输入hpias-1000高清晰度彩色病理图像细胞测量系统分析，每个时期各选10个视野。 　　2　结　果 　　2.1　光镜观察 　　gd1312天小时对照组及实验组胚胎舌体位置较高，腭突位于舌体两侧向下垂直生长。gd1412天小时对照组舌体降至口底，腭突上抬至舌体上方呈水平相对生长，部分腭突相互接触，中间嵴上皮在中线区形成上皮中缝。实验组腭突位于舌体两侧开始上抬。gd1512天小时对照组腭突接触融合，上皮中缝消失，间充质细胞相互连接形成完整的腭器官。实验组腭突在舌体上方呈水平生长，但体积较小，不能在中线区相互接触，腭裂形成(图1)。 　　2.2　免疫组化染色 　　egfr着色位于细胞膜和细胞浆中，呈棕黄色。在胚胎腭中主要表达于上皮成份中，间充质中有散在表达(图2)。 　　2.3　地塞米松对胚胎腭上皮细胞中egfr表达的影响 　　免疫组化染色结果经计算机图像处理系统分析后，将其平均光度值记录如附表。 　　2.4　地塞米松对胚胎腭间充质细胞中egfr表达的影响 　　结果见附表。免疫组化染色结果经计算机图像处理系统分析后，取平均光度值记录如图3。 附表　地塞米松诱发先天性腭裂对egfr表达的影响 　 　 口腔面上皮 腭突中嵴上皮 鼻腔面上皮 1312 对照组 　0.022±0.004 　　0.022±0.009 　0.026±0.007 (n=10) 实验组 0.023±0.008 0.024±0.007 0.024±0.003 1412 对照组 0.137±0.042 0.143±0.019 0.121±0.025 (n=10) 实验组 0.064±0.009* 0.046±0.014* 0.058±0.013* 1512 对照组 0.172±0.027 　　　- 0.191±0.053 (n=10) 实验组 0.184±0.033 0.179±0.024 0.171±0.031 本新闻共2页,当前在第1页12 责任编辑：姚红祥

医患交流

无论你有什么口腔方面的问题，都可以在这里提问，我们的口腔专家将会在24小时内在医患交流栏目为你解答    口腔文章 医患交流 供求信息 供应信息 求购信息 合作信息 企业搜索 招聘信息 人才信息 *问题: 来自省分: 姓名:

相关查找

平阳霉素联合地塞米松    平阳霉素和地塞米松联    平阳霉素与地塞米松注    地塞米松在诱发先天性    联合应用小剂量胃复安    地塞米松在诱发先天性    平阳霉素和地塞米松及    平阳霉素联合地塞米松    平阳霉素联合地塞米松    平阳霉素联合地塞米松    平阳霉素联合地塞米松    平阳霉素联合地塞米松    平阳霉素联合地塞米松