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　三氧化二砷抑制口腔鳞癌细胞增殖      

发表时间：2007-1-9 9:40:00

更多保健方面的文章请到中国保健网>>      　　摘　要：目的：体外试验研究三氧化二砷对口腔鳞癌的可能治疗作用。方法：以人舌鳞状细胞癌细胞系tca8113细胞为研究对象之一，采用台盼蓝拒染法计数活细胞，观察三氧化二砷作用于tca8113细胞的量效关系、时效关系。采用平皿法姬姆萨染色观察三氧化二砷对tca8113细胞的克隆形成抑制作用。以舌鳞状细胞癌临床新鲜标本组织块为研究对象之二，消化后细胞悬液与各浓度三氧化二砷、一定浓度的mtx、5-fu、pym体外培养后mtt法测定临床舌癌细胞生长抑制率。结果：三氧化二砷对tca8113细胞、临床舌癌细胞均有显著生长抑制作用。1μmol as2o3台盼蓝染色活细胞计数tca8113细胞生长抑制率28.57%，克隆形成抑制率31.01%;3μmol as2o3浓度tca8113细胞生长抑制率58.36%，克隆形成抑制率76.63%;5μmol as2o3浓度tca8113细胞生长抑制率86.03%,克隆形成抑制率91.30%。体外药敏测定：1μmol浓度as2o3的临床舌癌细胞的生长抑制率39.5%，3μmol浓度as2o3为47.2%，5μmol浓度as2o3为89%，mtx为36.5%，5-fu为41.3%，pym为58.16%。临床药敏标准一般大于30%为敏感，pym大于50%为敏感。结论：体外试验表明三氧化二砷可显著抑制人舌鳞状细胞癌细胞系tca8113细胞的生长，对临床癌细胞也表现了良好的抗增殖作用，三氧化二砷可能成为治疗口腔鳞癌的有效药物。 　　三氧化二砷是最早用于治疗恶性肿瘤的化疗药物之一，在近一个世纪的研究中，三氧化二砷既作为毒物致死人命，又被认为是恶性肿瘤的诱导剂，特别象是肺癌和皮肤癌的致癌物。近来，三氧化二砷用于治疗急性早幼粒细胞白血病取得了显著的疗效，对其机理的研究表明三氧化二砷是一种凋亡诱导剂和增殖抑制剂，其对其它恶生肿瘤的作用即抗瘤谱还不清楚。本研究对三氧化二砷在口腔舌鳞癌中的抗增殖作用进行了初步探讨，现报导如下： 　　材料和方法 　　1　材料 　　1.1　舌癌细胞：采用人舌癌细胞系tca8113作为靶细胞之一，以prmi1640完全培养液传代培养。实验时将tca8113细胞株细胞消化计数调整浓度为2×105/ml。将临床手术切除的人舌癌原发灶标本制成一定浓度的细胞悬液，同样以prmi1640完全培养液培养。 　　1.2　化疗药物：as2o3哈尔滨医大附一院制备，储存液以生理盐水稀释为100μmol/l。顺铂(ddp)、5-氟脲嘧啶(5-fu)、氨甲喋呤(mtx)、氮芥(hn2)、平阳霉素(bleo)。 　　2　方法 　　2.1　将形态正常、生长良好的tca8113细胞消化后，以2×105个细胞/ml的浓度接种于prmi1640培养液内培养(37°c，5%co2)。实验时收集细胞并用台盼蓝拒染法计数活细胞。细胞活力(%)=活细胞数/总细胞数×100%；生长抑制率(%)=(对照组-实验组)/对照组活细胞数×100%。 　　2.2　取对数增殖期细胞，0.25%胰酶消化单细胞悬液，将150～200个tca8113细胞接种于培养皿中，37°c、5% co2饱和空气和湿度条件下培养24小时后加入药物，继续培养12天后终止培养，固定后姬姆萨染色，计数细胞集落，(细胞数＞50个为一个集落)。克隆形成抑制率=(1-实验组克隆数/对照组克隆数)×100%。 　　2.3　将临床切除的新鲜舌癌标本组织块制成一定浓度的癌细胞悬液，采用mtt法检测as2o3-10μmol/l、cddp100μg/ml、mtx、5-fu、nh2、bleo的抗增殖作用。 　　3　结果 　　3.1　三氧化二砷对tca8113的抗增殖抑制作用 　　根据台盼蓝活细胞拒染法计数结果，得到三氧化二砷作用tca8113细胞的不同时间、不同浓度的抗增殖抑制率，作出其量-效、时-效关系。(如图1、2)在5μmol/l浓度下作用tca8113细胞72小时时，增殖抑制率达86.03%，作用120小时达95.15%。 图1　三氧化二砷对tca8113细胞抗增殖作用的量效关系 图2　三氧化二砷对tca8113细胞抗增殖作用的时效关系 　　3.2　三氧化二砷对tca8113细胞的克隆形成抑制试验结果 　　克隆形成抑制试验也表明三氧化二砷对tca8113细胞有明显的抗增殖抑制作用。在3μmol/l浓度下其克隆形成抑制率76.63%，5μmol/l浓度下克隆形成抑制率91.30%。(见图3)本新闻共2页,当前在第1页12 责任编辑：姚红祥

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