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 4nqo饮水诱发大鼠舌癌模型的建立      

发表时间:2007-1-9 9:40:00

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       【摘要】 目的 建立与人口腔环境相近的大鼠舌癌模型。方法 0.002%4-硝基喹啉-1-氧化物 (4nqo)饮水喂养sd大鼠 9~32周,肉眼及组织学观察癌变全过程。结果 随致癌剂作用时间延长,大鼠舌背后部粘膜相继出现白色斑块、溃疡、糜烂、乳头状增生等改变。9周后80.0%大鼠舌背粘膜表现为单纯性上皮增生,20.0%为轻中度异常增生;13周后66.6%为轻中度异常增生,33.3%为重度异常增生;16周后55.5%为重度异常增生,44.4%为原位癌; 32周后12.5%为重度异常增生,12.5%原位癌,75.0%为侵袭性高分化鳞癌;用药9、13、16周,停药后观察到32周时,舌癌发生率分别为 50.0%、62.5%、77.8%。未见远处转移。结论 4nqo饮水诱发大鼠舌癌生长缓慢、潜伏期较长,致癌过程和组织病理学特征与人口腔癌相似,方法简便,靶器官代表性强,为口腔癌的发生机制研究和防治药物筛选提供了较理想的动物模型。   在口腔癌的研究中,需要重复性好、稳定、易建立且与人口腔癌发生相似的动物模型。传统的口腔癌模型以二甲基苯并蒽(dimethlbenzanthracene,dmba)涂擦诱发金黄地鼠颊囊癌变为最多见[1]。我们采用水溶性致癌剂4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline-1-oxide,4nqo)口服,成功地诱发大鼠舌背粘膜癌变,有明显舌靶向性,为实验性口腔癌尤其是舌癌变研究提供了较理想的动物模型。   材料与方法   1.实验动物与试剂:雄性sd大鼠80只(中国科学院上海实验动物中心提供),体重220±10g,鼠龄160天。在室温18℃~25℃,湿度30%~50%,精制饲料喂养,24小时光暗循环条件下饲养。   4nqo(美国sigma公司)用蒸馏水配制成0.1%浓度,置 4℃冰箱避光保存。用时普通自来水配制成0.002 %浓度置避光瓶内喂养。   2.实验分组: 按随机数字表将 80只大鼠分为8组,每组10只。a组:4nqo诱癌至 9 周时处死;b组:4nqo诱癌至 13 周时处死;c组:4nqo诱癌至 16 周时处死;d组:4nqo诱癌至 32 周时处死;e组:普通自来水喂养至 32 周时处死;a组:4nqo诱癌 9 周,观察至 32周时处死;b组:4nqo诱癌 13周,观察至 32周时处死;c组:4nqo诱癌 16 周,观察至 32周时处死。   3.实验观察: 实验全过程中,各组动物分期进行肉眼观察和记录,处死后取全舌、可疑颊、腭、龈、颌骨、颌下和颈部淋巴结、咽、食道、前胃、肺等组织,carnoy′s液固定,常规石蜡包埋,4μm切片,he染色后光镜观察。诊断与分级参照who(1978)标准[2]。   结果   1.一般情况:实际可评价动物数 69只,11只大鼠在完成实验前死亡(肺炎 5只、肿瘤恶液质 3只、乙醚麻醉死亡1只、细胞培养处死 1只、组织学对照处死1只)。实验过程中用药组大鼠无明显毒副反应,体重较同期对照组大鼠略轻。   2.肉眼观察:正常大鼠舌背粘膜呈粉红色富有弹性,乳头分布均匀,舌体柔软。 用药9周后,舌背粘膜略粗糙、发白,局部充血;13周后,舌背后部粘膜散在多个乳白色小点,稍高出粘膜面,略粗糙;16周后,舌背人字沟附近粘膜呈乳白色斑块,粗糙并略突出于粘膜表面,触之稍硬;24 周后,舌背人字沟附近粘膜出现乳头状新生物,表面粗糙,刺激时易出血;32 周后,舌背人字沟附近粘膜新生物呈菜花状,局部糜烂,侵及粘膜深层。进食困难,呈恶液质状。   3.组织学观察:随致癌剂作用时间延长,大鼠舌背产生单纯性上皮增生→异常增生→原位癌→侵袭性癌的典型病理变化。上皮异常增生主要表现为过度角化,基底细胞层数增加及极性消失,上皮钉突呈滴状,层次紊乱,核浓染,有丝分裂象增加(图1)。高分化鳞癌的癌细胞突破基底膜侵入粘膜下层及肌层,形成同心圆排列的癌巢和层状癌珠(图2)。最早出现侵袭性高分化鳞癌的时间是用药 27 周末。除 d组 1例舌癌大鼠并发腭癌且侵犯颌骨外,余未见远处转移,上消化道其他部位未见癌变征象。本新闻共2页,当前在第1页12 责任编辑:姚红祥

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