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口腔颌面部恶性肿瘤化疗药物敏感
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发表时间:2007-1-9 9:40:00
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摘 要:目的 恶性肿瘤化疗的一个最大问题是肿瘤对化疗药物的耐药性。mtt肿瘤药敏检测是一种定量比色体外药敏测定方法。本研究的目的是初步评价mtt药敏检测结果对指导口腔肿瘤个体化化疗的临床意义。方法 应用30例口腔颌面外科手术或活检的恶性肿瘤标本,进行常规mtt药敏检测,同时将检测结果与临床资料进行对比性分析。检测药物共有6种:ddp、5-fu、vds、mtx、e-adm、pym。结果 (1) 病变部位以舌部为主,占30%,药物敏感性与肿瘤部位有关;(2) 检测30例口腔颌面部恶性肿瘤组织的药敏性,所得结果与临床资料进行分析。8例采用传统经验用药方案进行化,其疗效与mtt法检测的药敏结果一致;(3) 大部分肿瘤对ddp、5-fu有中度以上敏感性,但也有少部分存着抗ddp、5-fu现象,这也是临床上采用传统经验用药方案,有些肿瘤化疗效果不理想的原因之一。结论 通过肿瘤药敏检测,找出对恶性肿瘤有效的化疗药物组成联合用药方案,可以做到化疗方案的个体化,进而提高疗效。
口腔颌面部中、晚期恶性肿瘤必须采用综合性治疗,才能取得较好的治疗效果。化疗是综合治疗主要手段之一,治疗方案的选择是化疗成败的关键[1];而有效的化疗方案确定取决于对肿瘤敏感性药物的选择和应用。应用mtt方法对肿瘤药物敏感性检测,为敏感药物选择提供了条件。本文对30例口腔颌面部恶性肿瘤组织标本的药物敏感性测试结果与其临床资料进行分析,希望对口腔颌面部恶性肿瘤化疗方案制定提供有效参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 组织标本 30例口腔颌面部恶性肿瘤组织新鲜标本来自我院1999年6月~1999年11月手术和活检组织标本,所有病例均有明确的病理诊断。
1.1.2 药敏检测选用药物 顺铂(ddp)齐鲁制药厂,氨甲喋呤(mtx)上海华联制药厂,氟脲嘧啶(5-fu)旭东海普药业,长春地辛(vds)杭州民生药厂,平阳霉素(bym)天津太河制药厂,表阿霉素(e-adm)深圳万乐药厂。
1.1.3 试剂 mtt[四甲基偶氮唑蓝,3-(4,5-dimthy-2-2 thiazoly)2,5-dipheny-2h-tetrazoliun bromide];dna酶、胶原酶、透明质酸酶、rphi-1640培养剂均购自gibco试剂公司。
1.1.4 设备材料 pg3022酶联免疫检测仪(中国人民解放军第四军医大学国营华东电子管厂联合研制,波长570nm,参数波长450nm);96孔培养板(corning公司)。
1.2 mtt药物检测方法
采用mtt assay[2]并作以下修改:(1) 将组织标本用pbs(含丁胺卡那霉素200u/ml、青霉素500u/ml)浸泡20min后,胶原酶2mg/ml、dna酶0.4mg/ml、透明质酸酶0.017mg/ml消化40min,200目滤网收集细胞,pbs洗一次。(2) 取96孔板每孔加200μl细胞悬液每四孔为一组,设对照组及各药物组。(3) 培养板置37°c含5%co2湿度培养24h后,加入实验药物(10倍的血浆浓度)于培养孔中,继续培养48h。(4) 每孔加mtt试剂(5mg/ml)20μl,再于37°c co2培养箱中培养4h以上。(5) 离心(2000r/min)5min,吸除上清液,加200μl dmso以终止反应及溶解甲fda3结晶。(6) pg3022酶联免疫检测仪波长450nm测od值。(7) 肿瘤细胞生长抑制率计算公式:
肿瘤细胞生长抑制率=(1-a/b)×100%
a=试验孔平均od值 b=对照孔平均od值
(8) 药物敏感性判断标准 敏感:细胞生长抑制率>70%,中度敏感:细胞生长抑制率>50%,低度敏感:细胞生长抑制率≥30%,不敏感:细胞生长抑制率<30%。
2 结果
2.1 标本来源
30例病人选自1999年6月~1999年11月我科收治的口腔颌面部恶性肿瘤住院患者。年龄范围13~80岁,平均52岁,男女之比1.2∶1。肿瘤原发部位以舌部最多见,占30%;牙龈占23%、颊部占20%;上颌窦、腭部、颧部、颞下凹等部位共占27%;发病部位与化疗药物敏感性关系见表1。
2.2 术前化疗患者的术后标本对的化疗药物敏感的检测本新闻共3页,当前在第1页123
责任编辑:姚红祥
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