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　复发性口疮患者细胞遗传学的初步      

发表时间：2007-1-7 20:28:00

更多保健方面的文章请到中国保健网>>     作者单位：617067攀枝花，市中心医院 关键词：复发性口疮；遗传因素；病因 　　提　要　本文对184 rau患者进行了家族史调查。同时应用现代细胞遗传学技术，对60名rau患者（40名有家族遗传史，20名无家族遗传史）外周血淋巴细胞的sce、微核发生率和染色体畸变率进行研究，并以30名男女青年学生作对照，探讨rau与患者遗传因素的关系。结果：①184名rau患者的一级亲属中患有rau者63人，即有遗传家族史者占34.2％。②rau患者无论其有无家族遗传史，其sce频率均显著高于健康人（p＜0．01）。③rau患者无论其有无家族遗传史，其微核发生率均明显高于健康人（p＜0.05）。④rau患者染色体结构畸变率显著高于健康人（p＜0.01）本实验结果表明，rau患者可能存在某些病理性遗传素质和遗传物质的异常，支持遗传因素在rau发病中可能起着十分重要的作用。 　　材料和方法 　　研究对象： 　　1.　正常对照组：选择无口腔粘膜病及系统疾病，身体健康的攀枝花卫校和成都二卫校实习生30名，男15名，女15名，平均年龄21岁。 　　2.　rau组：根据病史和临床表现诊断为rau患者184人，男82人，女102人，年龄6～70岁，平均39岁，病史1.5～25年不等。要求患者无系统疾病，病变复发频率至少每月一次以上或无间歇，3月内未接受影响免疫功能和cu、zn、fe、mg变化的药物治疗。根据病史调查，184名rau患者的一级亲属（父、母、子、女、兄、妹）中患rau者63人，即有遗传家族史者占34.2％，其余121人无遗传家族史。 　　2.1　无家族史患者组：从121无家族史患者中抽出20名无放射线接触史，无烟酒嗜好，无明显环境因素影响的患者，男10人，女10人，年龄22～61岁。 　　2.2　有家族遗传史患者组：从63名有家族史患者中抽出40名，二年内无放射线接触史，无烟酒嗜好，无明显环境因素影响的患者，男16人，女24人，年龄7～72岁。这40名患者中19人有直接亲代关系（8个家庭），6人为同胞兄妹（3个家庭）。 　　试验方法： 　　三组受检者静脉采血2ml，抗凝待检。 　　1.　细胞培养：将待检静脉血0.3ml接种于含4ml rpmi 1640培养基，小牛血清1 ml、pha（加有双抗）0.1ml、肝素0.025ml（500u/ml)，按终浓度10ug/ml加入brdu(5-溴脱氧尿嘧啶核苷）的培养液中。全部标本放入37℃孵箱中避光培养72小时，终止培养前6小时按浓度0.06μg/ml加入秋水仙素。 　　2.　细胞收集与制片：培养液以1000转/分离心10分钟，用0.075 m kcl（37℃）低渗12分钟，最后两分钟加入1ml甲醇、冰乙酸（3∶1v/v)预固定。每次固定完毕均以1000转/分离心10分钟，共固定3次。最后用湿冷玻片滴片，经37℃老化24小时后。再作分化染色。 　　3.　染色、镜检：采用紫外线照射加吉姆萨染色（upg）法，镜检。 　　3.1　sce计数：每一个受检者计数25个分散良好、色差分明的第二中期分裂细胞，用盲片法分别记录每个细胞的sce数。凡在染色单体末端发生的互换记为1次sce；在染色单体中间发生的交换记为2次sce；在着丝点处发生的交换，并判明不是染色单体扭转者也记为1次sce（图1）。 图1　为sce图象（he，5×100） 　　3.2　微核发生率计数：在观测sce的玻片上同时观测1000个转化淋巴细胞的微核细胞数。以千分率表示含微核的细胞数，每个出现微核的细胞只记录一次（图2）。 图2　为微核图象（he，2.5×100） 　　3.3　染色体结构畸变率计数：观测染色体畸变率的玻片直接吉姆萨染色，每个受检者观测50个分散良好的中期分裂相细胞，记录结构畸变的细胞数（图3）。 图3　为可见染色体断片（he，2.5×100） 　　上述sce频率、微核发生率、染色体结构畸变率观测的各项结果分析均采用完全随机检验分析，数据处理用ibm微机，应用其中window 95中excel表格程序完成。 　　 结果本新闻共2页,当前在第1页12 责任编辑：唐建华

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