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　3种根尖倒充填材料对人牙周膜细      

发表时间：2007-1-6 12:27:00

更多保健方面的文章请到中国保健网>>     关键词：根尖倒充填材料 　　［摘要］ 目的：观察3种根尖倒充填材料对人牙周膜细胞生长及超微结构的影响，从而指导材料的选择。方法：用材料直接接触细胞并计数以及透射电镜观察细胞结构变化。结果：3种材料接触培养后细胞生长速度减缓，3种材料之间差异有显著意义,细胞内超微结构显示内质网,线粒体等细胞器及细胞核的结构均有改变。结论：本实验的3种根尖倒充填材料对牙周膜细胞均有毒性作用，其中光固化复合树脂和银汞合金毒性较强，而化学固化玻璃离子粘固剂毒性较弱，临床使用较好。 　　［关键词］ 根尖倒充填材料 人牙周膜细胞 超微结构 牙周膜细胞(periodontal ligament cell，pdlc)是牙周膜中最多,功能上也是最重要的细胞，是人牙周膜组织中的主要间质细胞，不仅具有合成胶原、基质、弹力纤维和糖蛋白的功能，还有吸收胶原、吞噬异物的能力，在牙周组织的生理和病理中起重要作用。在口腔临床根尖周病和牙周病治疗的预后观察指标中,牙周组织的愈合方式是一项重要指标。根尖周愈合有5种基本形式，主要是由牙周膜组织合成胶原以及发育为成骨细胞和成牙骨质细胞进行修复的。在根尖倒充填术中,材料与根尖周组织直接接触，从而对根尖周的愈合有较大的影响。 目前，临床上所用的根尖倒充填材料有很多。本文通过体外人牙周膜细胞（ human periodontal ligament cell，hpdlc）培养，用3种根尖倒充填材料（银汞合金，光固化复合树脂，玻璃离子粘固剂）直接接触细胞，来观察它们对hpdlc生长及内部超微结构的影响，从而进一步探讨这3种根尖倒充填材料在根尖周组织愈合中的作用，为寻找更合适的根尖倒充填材料提供参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 银汞合金（北京，安泰科技股份有限公司）、光固化复合树脂（heraeus kulzer dental ltd）、化学固化玻璃离子粘固剂（shofu inc.kyoto japan）。按说明调制新鲜的银汞合金，光固化复合树脂，化学固化玻璃离子粘固剂，制成d=3 mm，h=3 mm的短柱状试样，用洗涤剂自来水反复洗涤，三蒸水清洗，用双面贴固定于盖玻片上,超净台上紫外灯照射双面4 h，备用。 　　1.2 细胞培养 取临床因正畸需要或阻生拔除的无龋病，牙周病，根尖周病的健康前磨牙或阻生牙，9~29岁，拔牙后立即用生理盐水反复冲洗根部，移至超净台内，再以加双抗的rpmi1640液冲洗两次，刮取根中2/3的牙周膜组织，用组织块贴壁法进行原代培养，培养条件（37 ℃，100%湿度， 5% co2+95%o2），原代细胞生长至第3代，作细胞爬片，用免疫细胞化学染色进行细胞鉴定，以证明细胞来源，取第6代细胞用于实验。 　　1.3 实验分组 第1组：银汞合金（ag-hg）；第2组：光固化复合树脂（lcr）；第3组：化学固化玻璃离子粘固剂（gic）；第4组：阴性对照(标准培养液即rp1640+10%fbs的全培养液)，每组3个复孔。每组均分2个时间段进行测定：分别培养5 d、7 d。 　　1.4 检测 将用双面贴固定于盖玻片上的材料按以上分组放入24孔板中，每组3个复孔，共12孔/板，准备3块板。 　　1.4.1 细胞计数 将第6代长满瓶底的pdlc用0.25%胰酶消化成终浓度为5×104/ml的单个细胞悬液， 以1 ml/孔接种至3块24孔板，标准条件培养24 h；吸去各孔培养液，分组加标准培养液，一块板培养5 d，一块板培养7 d，隔天换一次液，分别在第5天，第7天进行细胞计数，记录。 　　1.4.2 透射电镜观察 第3块板培养到第五天时用细胞刮刮取细胞，移入10 ml尖底离心管加4 ℃预冷的pbs至10 ml，吸管吹打均匀，2 000 r/min离心15 min，弃上清，加4 ℃预冷的2%戊二醛4 ml固定2 h，剥离细胞团块移入青霉素小瓶，pbs漂洗3次，10 min/次。1% oso4在4 ℃固定2 h，pbs漂洗3次，系列乙醇脱水、浸透、包埋、修块、切片、电子染色、透射电镜观察细胞超微结构、照相。本新闻共3页,当前在第1页123 责任编辑：唐建华

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