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　超氧化物歧化酶对变链菌生长和粘      

发表时间：2007-1-6 12:27:00

更多保健方面的文章请到中国保健网>>      　　摘要　　目的：了解超氧化物歧化酶(sod)对变链菌ingbritt、6715 生长和粘附的影响情况。方法：用麦氏比浊法分别比较不同浓度sod对两种变链菌蔗糖琼脂培养基纯培养的细菌生长量；用液闪计数值比较sod对两种变链菌体外在羟基磷灰石(ha)上的粘附量。结果：在sod存在时，两种致龋菌的生长量大于没有sod时的生长量；sod作用于获得性膜和致龋菌的体外粘附过程时，两种致龋菌的粘附量显著降低，sod作用于致龋菌生长过程，变链菌ingbritt 的粘附量升高，变链菌6715的粘附量显著降低。结论：外源性sod促进致龋菌的生长， 使致龋菌的粘附量发生改变。　　ze=3>　　变形链球菌(streptococcus mutans,简称变链菌)是口腔中主要致龋菌，是兼性厌氧菌，它的能量代谢依赖于糖酵解［1］，由于缺乏细胞色素和过氧化氢酶系统，变链菌不能进行有氧氧化作用， 但是由于超氧化物歧化酶(sod)的存在［2］，变链菌能够在有氧条件下生长，并进行氧的代谢活动，nakayama(1992)［3］报道：缺乏sod的变链菌能够在有氧条件下生长，但生长速度比有sod的变链菌慢。本研究通过外源性sod的加入，观察变链菌的生长及在体外与羟基磷灰石(ha)的粘附情况。1　材料和方法　　变形链球菌ingbritt、6715标准株(第四军医大学口腔医学院检验科保存)复苏、生化鉴定后，加入蔗糖琼脂培养基(第四军医大学西京医院检验科制备)，厌氧(37℃，800ml/l n2，100ml/l h2，100ml/l co2)培养18h，pbs(ph=7.0)缓冲液离心洗涤3 次(4℃，10?000r/min，15min)后，采用麦氏比浊法，分别用pbs缓冲液稀释至1×1012cfu/l，每种细菌分装于7支灭菌的小试管内，每管 1ml，离心，弃去上清，分别按浓度梯度(单位g/l)0.1、0.05、0.025、0.0125、0加入pbs配制的sod(活性单位：3×106u/g液，再在每管中加蔗糖琼脂培养基，使每支小试管中的液体总量达4ml，另两支试管分别加入 0.1g/l sod液和等体积pbs 液， 再加入蔗糖琼脂培养基， 使其体积为4ml，按3.7×107bg/l加入3h-tdr(中国科学院北京原子能研究所)，振荡混匀后， 置厌氧孵箱(37℃，800ml/l n2，100ml/l h2，100ml/l co2)18h，离心，采用麦氏比浊法测每管细菌量。加3h-tdr的4支试管，采用麦氏比浊法，分别用pbs缓冲液稀释至1×1012cfu/l，按以下过程进行粘附实验，5mg ha(sino-american biotechnotgy公司产品，华美生物工程公司分装)＋100μl全唾液(37℃，6r/mim 2h) → pbs 缓冲液洗两次→ 100μl,5g/l人血白蛋白pbs缓冲液(37℃，6r/min 30min)→pbs缓冲液洗两次， 阳性对照组加入未加sod培养的3h-tdr标记的细菌100μl，阴性对照组加入0.1g/l 灭活的sod液100μl和未加sod培养的3h-tdr标记的细菌100μl，实验组又分成三组，第一组先加入0.1g/l sod液100μl(37℃，6r/mim，2h)→pbs洗两次→100μl未加sod培养的3h-tdr标记的细菌，第二组加入0.1g/l sod液100μl和未加sod培养的3h-tdr标记的细菌100μl；第三组加入培养时加sod液的3h-tdr标记的细菌100μl， 以上五组在37℃，6r/min旋转1h，pbs洗三次，烤干，加入1ml闪烁液，液体闪烁计数得每分钟计数值。　　2　结果　(表1、2) 表1　不同浓度(g/l)sod对致龋菌生长的影响(cfu/ml) 菌名 0.1 0.05 0.025 0.0125 0 ingbritt 2.0×1010 2.0×1010 2.5×1010 2.0×109 5.0×109 6715 2.5×1010 2.0×1010 1.5×1010 1.0×1010 2.0×109 　　变链菌6715生长量在sod存在时大于没有sod时。变链菌ingbritt的生长量在sod浓度为0.0125g/l时低于没有sod时的量，但ingbritt在sod 存在时生长量在总体趋势上是大于没有sod时的，也就是说sod对两种致龋菌的生长有不同程度的促进作用。 表2　sod对致龋菌粘附的影响　　　(min-1) 菌名 阴性对照 阳性对照 第一组 第二组 第三组 ingbritt 910 1087 508 321 1543 　 985 1347 665 465 1552 6715 1114 1427 399 908 634 　 1467 1877 550 1036 710 本新闻共2页,当前在第1页12 责任编辑：姚红祥

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