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　牛血小板衍化生长因子盖髓的实验      

发表时间：2007-1-6 12:27:00

更多保健方面的文章请到中国保健网>>     摘要　　目的：观察牛血小板衍化生长因子(bpdgf)覆盖狗暴露牙髓后的盖髓效果。方法：用活体狗牙作直接盖髓实验，并用组织学方法评价其效果。结果：术后6周，bpdgf能够诱导牙髓成纤维细胞、内皮细胞增殖及抑制炎症反应，提高牙髓修复能力。结论：bpdgf促进狗牙髓组织修复。　　在牙髓病治疗中，如何促进牙髓、牙体硬组织的生理性修复和再生是课题的中心环节，随着分子生物学技术的飞速发展，动物实验表明：人血小板纯化的血小板衍化生长因子(platelet derived growth factor简称pdgf)可诱导牙髓成纤维细胞发生趋化作用，并促进细胞的dna合成，对细胞基质有调节作用［1，2］。但是，目前pdgf对于牙髓组织的作用，尤其是对于牙髓牙本质复合体的愈合修复功能有何影响，报道较少。　　　　在血清中，pdgf是一种很强的致丝裂因子，它存在于血小板α颗粒中，国外已成功地从人血小板中分离出高纯度的pdgf［3］。但pdgf的提纯方法较为复杂，尤其是人血小板来源困难，费用较高。故现采用较为简单的方法从牛血小板中提取和纯化了pdgf，作为直接盖髓剂，观察它对创伤牙髓组织修复的作用机制，为pdgf在牙髓病中的治疗学研究提供新的更为直观的形态学依据。1　材料和方法　　取体重为5～6kg的成年杂种狗3只，雄性，将每只狗全口牙齿随机分为两组：牛pdgf组，牛血清白蛋白组，每组10个牙齿。25g/l戊巴比妥钠腹腔麻醉后，用30ml/l过氧化氢液清洗口腔，10g/l碘酒消毒手术野，在牙齿的唇颊侧距龈缘2mm处制洞，直径约0.5mm，暴露牙髓，生理盐水冲洗，止血后，在牙髓暴露面上直接放置20μg牛pdgf絮状物或牛血清白蛋白絮状物(第四军医大学口腔医学院牙髓生物学研究室)，常规丁香油水门汀垫底，磷酸锌水门汀充填，全部操作均由一人完成。分别于术后4周、5周经25ml/l戊二醛心脏灌注处死动物后，分离上下颌骨，并在100ml/l中性福尔马林液中再固定24h。组织经100g/l edta脱钙2～3周后，按常规石蜡包埋切片，he染色，光镜下进行形态学观察。2　结果　　术后4周，牛pdgf组缺损边缘的修复性牙本质较其它区域略显增厚，并向缺损区延伸(图1)。牙髓血管数量明显增多，纤维细胞数量增多并呈薄膜状将缺损包绕，牙本质缺损区仍明显，暴露处牙髓见轻度慢性炎细胞浸润。牛血清白蛋白组缺损明显，未见牙本质缺损的修复，牙髓暴露处纤维细胞增多，血管充血明显，组织中弥散着大量慢性炎细胞(图2)。 图1　术后4周，牛pdgf组缺损边缘修复性牙本质较其它区域略显增厚，并向缺损区延伸 he×40 图2　术后4周，牛血清白蛋白组缺损明显，组织中弥散着大量慢性炎细胞　he×33 　　术后6周，牛pdgf组20个牙中，16个牙缺损区周围牙髓基本恢复正常，偶见弥散分布的慢性炎细胞。由于钙化物及新生牙本质的沉积，牙齿的穿孔区已基本修复(图3)。有4个牙穿孔部位修复，可见弥散分布的慢性炎细胞沉积。牛血清白蛋白组，20个牙中，有14个牙牙本质缺损仍明显，缺损区边缘牙本质见少许修复性牙本质形成(图4)。炎细胞数量较前减少，缺损区牙髓纤维化明显，并形成较厚的被膜包绕盖髓材料。4个牙缺损区仍弥散着大量慢性炎细胞，2个牙组织坏死。 图3　术后6周，牛pdgf组牙穿孔区由钙化物及新生牙本质修复　he×33 图4　术后6周，牙本质缺损仍明显，缺损区边缘牙本质见少许修复性牙本质形成　he×33　　　 3　讨论　　pdgf是一种可作用于机体多种组织器官的具有多功能的生长因子，生物学作用主要体现于其对多种细胞的趋化作用、促进细胞增殖和伤口愈合等方面［4，5］，已有体外实验证实pdgf可以促进牙髓、牙周膜成纤维细胞dna合成［1，2］。近来，已有进一步的实验证实在正常牙髓细胞、牙髓微血管内皮细胞中存在pdgf受体，这更进一步揭示了pdgf可能参予牙髓组织的代谢及生理病理学反应过程。牙髓成纤维细胞是牙髓组织的主要细胞成分，在牙髓组织中有其重要的地位，由于pdgf具有诱导成纤维细胞趋化和增殖的特性本新闻共2页,当前在第1页12 责任编辑：姚红祥

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