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　白细胞介素1受体拮抗剂在人牙髓      

发表时间：2007-1-6 12:27:00

更多保健方面的文章请到中国保健网>>      　　摘要目的：了解正常人牙髓组织及炎性牙髓组织中白细胞介素1受体拮抗剂(il-1ra)的表达，探讨它在牙髓组织正常防御和内毒素性牙髓炎中的作用机制。方法：用abc免疫组织化学法检测il-1ra在牙髓组织中的表达。结果：在正常牙髓组织中仅有少量血管内皮细胞、巨噬细胞表达il-1ra，在炎症牙髓组织中il-1ra染色呈阳性，主要表达细胞为中性粒细胞、浆细胞、淋巴细胞和血管内皮细胞。结论：内源性il-1ra在牙髓炎症的发生发展中可能起着重要作用。　　　　许多文献证实：细胞因子间量的失衡是炎症产生的主要原因，正常情况下人体细胞因子以网络的形式发挥作用，它们之间相互制约，相互协调，维护细胞因子之间量的稳定，这种平衡关系也是维持牙髓、牙周组织正常生理功能的重要条件。对于白细胞介素1受体拮抗剂（interleukin-1 receptor antagonist，il-1ra) 在炎症中的作用，及在一些炎症组织中表达已得到证实，并且许多学者认为，il-1与il-1ra之间的平衡是维持组织自身稳定的一个重要调节机制，这种平衡关系的打破将导致机体疾病发生［1］。目前，il-1ra在牙髓炎症组织中是否表达研究甚少，本实验的目的是了解正常牙髓组织及牙髓炎症情况下il-1ra的表达情况，探讨它在牙髓组织正常防御和牙髓炎中的作用，进一步为阐明牙髓炎的致病机理提供理论依据。1　材料和方法1.1　主要试剂　　鼠抗人α-il-1ra mcab(北京医科大学免疫教研室)；abc免疫组化染色试剂盒(sigma，usa)。1.2　实验方法　　取口腔颌面外科门诊患者因治疗需要拔除的健康第三磨牙或前磨牙为正常对照组，临床诊断为慢性牙髓炎需拔除的第三磨牙为炎症组，并通过组织学切片，he染色作为病理学分组标准。　　正常对照组7牙，慢性牙髓炎组9牙。炎症组的牙齿均因近中阻生，近中邻合面大面积缺损已近髓，探痛（+），患者均有冷热痛症状，年龄在20～40岁之间，无明显全身疾患，近期未用过抗生素及免疫抑制剂。牙齿拔除后立即劈冠，取出冠髓，在40g/l多聚甲醛中固定4h，脱水，石蜡包埋，切片(5μm)，染色步骤如下：　　切片经二甲苯脱蜡系列乙醇至水3ml/l h2o2封闭内源酶 30min；pbs 5min×3；50ml/l正常羊血清孵育15min；鼠抗人il-1ra单抗(1：100)4℃过夜；pbs 5min×2，生物素标记兔抗鼠igg(1：100)37℃ 1h；pbs 5min×2；abc复合物室温孵育 40min；pbs 5min×2；新鲜配制的dab溶液染色，镜下控制显色强度，适时终止显色，苏木素复染细胞核；梯度乙醇脱水，二甲苯透明；中性树胶封片，镜下观察。　　阳性对照：正常sd大鼠肝组织切片同步进行上述染色。　　阴性对照：正常血清稀释液代替一抗，步骤与上述步骤相同。2　结果　　he染色表明，人正常牙髓组织中，细胞成份以纤维细胞为主，散在分布一些巨噬细胞(图1)。慢性牙髓炎的牙髓组织中大量炎细胞浸润，以浆细胞、淋巴细胞为主，且有小血管扩张充血(图2)。 　　　　　　　　　　图1　正常人牙髓组织,　　图2　炎症人牙髓组织,he染色 (40×3.6)　　　　　　　　　　　　he染色 (40×3.6) 　　免疫组化研究发现，正常牙髓组织中，仅少量巨噬细胞样细胞il-1ra染色阳性，另外可见弱着色的血管内皮细胞(图3)。炎症性牙髓组织中，大量炎细胞浸润，高倍镜下病灶区可见淋巴细胞染色阳性，浆细胞强阳性染色(图4)；中性粒细胞强阳性染色(图5)；血管内皮细胞il-1ra染色呈强阳性(图6)。 图3　正常人牙髓组织il-1ra染色，巨噬细胞、血管内皮细胞染色阳性 (20×3.6)　　　　 图4　炎症人牙髓组织il-1ra染色，　图5　炎症人牙髓组织il-　　图6　炎症人牙髓组织il-1ra巨噬细胞、淋巴细胞染色阳性，浆　　　1ra染色，中性粒细胞染色　　　染色，血管内皮细细胞呈强阳性染色　(40×3.6)　　　　　强阳性 (40×3.6)　　　　　　胞染色强阳性 (40×3.6)本新闻共2页,当前在第1页12 责任编辑：姚红祥

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