牙髓慢性炎症中p物质阳性神经纤

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　牙髓慢性炎症中p物质阳性神经纤

发表时间：2007-1-6 12:27:00

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    摘要目的：观察p物质阳性(sp-ir)神经纤维在正常牙髓中的分布，及其在慢性炎症过程中的变化，探讨sp与牙髓炎症的关系。方法：大鼠牙髓炎模型和免疫组织化学技术。结果：sp-ir神经纤维广泛分布于整个牙髓中，少量纤维进入牙本质小管；炎症早期sp-ir神经纤维数量增多、染色加重；炎症晚期，冠髓大量sp-ir神经纤维围绕于牙髓脓肿周围，根髓纤维发生出芽现象。结论：sp可能参与了牙髓炎症、修复过程，并可能与牙髓炎性痛过敏的发生有关。　　p物质(substance p，sp)是牙髓中最早发现的神经肽，研究证实含sp的神经纤维束源于三叉神经节［1，2］。神经肽所参与的神经活动远较经典递质广泛、复杂，sp在牙髓生理、病理过程中的作用尚不完全清楚。本研究利用免疫组织化学方法，观察了牙髓炎症过程中sp-ir神经纤维的动态变化，以期为探讨sp与牙髓炎的关系提供形态学依据。1　材料和方法1.1　实验分组　　sd大鼠16只，体重180～230g。以10g/l戊巴比妥钠经腹腔注射麻醉(40mg/kg体重)。分别在一侧上颌磨牙面制备近髓窝洞，用玻璃离子水门汀封入采集的新鲜龋坏组织。于术后1、4、8、14d各处死动物4只，取材。以对侧作为空白对照。1.2　样本制备　　实验动物在深度麻醉下开胸，经升主动脉灌注生理盐水100～150ml、含40g/l多聚甲醛的0.1mol/l磷酸缓冲液350～450ml，全部灌注时间约为90min。取双侧上颌骨，40g/l多聚甲醛后固定24h，脱钙液(8mol/l 甲酸与1mol/l甲酸钠按1：1体积比混合)于4℃下脱钙7d，含30%蔗糖的0.1mol/l磷酸缓冲液脱水24h，冰冻切片机切成厚50μm切片。1.3　免疫组织化学染色　　按abc法行免疫组织化学反应。所用抗体及效价：兔抗sp血清，效价1:5000(penisula lab, usa)；生物素化羊抗兔igg，效价1:500(vector lab, usa)；abc复合物，效价1:500(vector lab, usa)。按god/dab/nickel法呈色，1%明胶贴片，自然干燥，系列酒精脱水，二甲苯透明，d.p.x胶封片，光学显微镜观察并照相。2　结果　　在整个牙髓中均可见到sp-ir神经纤维的存在。在根髓中，sp-ir神经纤维呈束状平行于牙根长轴，未见分支(图1)，当进入冠髓后，开始逐渐分支，在成牙本质细胞层下形成神经丛，少数纤维进一步穿过成牙本质细胞层，进入前期牙本质和牙本质小管(图2)。图1　对照组根髓中sp阳性神经纤维呈束状平行于牙根长轴　(abc　×25)　　　图2　对照组冠髓中sp阳性神经纤维呈网状分布　　(abc　×50) 　　炎症1d，冠髓sp-ir神经纤维数量增多、增粗、染色加重，进入牙本质小管内的神经纤维数量增多、长度增长(图3)；根髓sp-ir神经纤维增多、染色加重。4d组，冠髓sp-ir神经纤维数量增多，并围绕于窝洞相对的髓室顶周围；根髓阳性纤维继续增多、深染，并见少量出芽(图4)。8d组，冠髓见坏死灶形成，增粗的sp-ir神经纤维围绕在周围(图5)，根髓阳性纤维增多、深染，并见出芽。14d组，牙髓大部坏死，根髓sp-ir神经纤维仍有增多、深染，并可见较多出芽(图6)。　　图3　炎症1d组，冠髓sp阳性神经纤维增多、深染　(abc　×50)　　图4　炎症4d组，根髓sp阳性纤维继续增多、深染，并见少量出芽　(abc　×50)　　图5　炎症8d组，冠髓坏死灶形成，增粗的sp阳性神经纤维围绕在其周围　(abc　×50)图6　炎症14d组，根髓sp阳性神经纤维仍有增多、深染，并见较多出芽　(abc　×100) 3　讨论　　sp是在初级传入无髓神经纤维(c纤维)的胞体合成的，通过轴流向中枢和外周运送，当神经受到刺激时从神经末稍释放出来［3］。sp的释放可被生长激素释放抑制因子(somatostatin, som)和阿片肽所抑制，同时，在人牙髓血管周围发现有som、亮氨酸脑啡呔(leucine-enkephalin, l-enk)和蛋氨酸脑啡呔(methionine-enkephalin, m-enk)免疫反应性神经纤维，提出牙髓中可能存在调制sp释放的局部反馈系统本新闻共2页,当前在第1页12 责任编辑：姚红祥

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