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正常及炎症牙髓组织中il-6的表达
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发表时间:2007-1-6 12:27:00
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〔摘要〕 目的:通过检测il-6在人牙髓组织中的表达,探讨il-6与正常及炎症牙髓组织的关系。方法:采用免疫组化(abc)法,检测正常组8个牙及炎症牙髓组10个牙中il-6的表达。结果:正常人牙髓组织il-6染色为阴性,炎症牙髓组织中il-6染色均呈阳性,主要表达细胞为单核-巨噬细胞,少量血管内皮细胞和成纤维细胞。结论:il-6与牙髓组织的炎症反应密切相关,是重要的炎症介质之一。
expression of il-6 in normal and inflammatory pulpal tissue
yue ling,xiao mingzhen,niu zhongying.
stomatological college,fourth military medical university, xi'an 710032
〔abstract〕 objective: to study the relationship between il-6 expression and human pulpal tissue inflammation.methods:il-6 expression in 8 samples of normal and 10 of inflammatory pulpal tissue was examined using immunohistochemical techniques.results:negative staining of il-6 was found in all the cases of normal pulpal tissue while positive in all inflammatory pulp.il-6 expression was found mainly in monocytes-macrophage and in a few vascular endothelial cells and fibroblasts.conclusion:il-6 may be an important medium factor in pulpitis.
key words interleukin-6;dental pulp;pulpitis;immunohistochemistry
il-6与炎症反应有着密切关系,在牙周炎、牙龈炎中的作用已经肯定,但有关牙髓炎症中的il-6表达和分布特征不明确。本组实验采用鼠抗人il-6单克隆抗体,对人炎症牙髓中il-6的表达和分布进行研究,探讨il-6与牙髓炎性病变的关系。
1 材料和方法
1.1 主要试剂
鼠抗人il-6单克隆抗体(第四军医大学免疫学教研室提供)
abc试剂盒(sigma co, usa)
1.2 实验标本
研究对象为西安秦都口腔医院口腔颌面外科门诊就诊患者,年龄在18~35 岁之间。取因治疗需要而拔除的健康第三磨牙为正常组,临床诊断为慢性牙髓炎需拔除的第三磨牙归为炎症组,并通过组织学切片,he染色作为分组的病理组织学依据。正常组8个牙,炎症组10个牙。
1.3 切片制作
新鲜离体牙牙髓置bouin液中固定4 h,梯度乙醇脱水,石腊包埋,制作厚4 μm切片。
1.4 免疫组化染色
石蜡切片经乙醇下降至水,用体积分数为30%的h2 o2 甲醇溶液去除内源性过氧化物酶,再以正常血清封闭。经0.01 mol/l pbs漂洗后,滴加第一抗体(鼠抗人il-6),4 ℃下作用48 h后漂洗,第二抗体为生物素标记兔抗素igg,37 ℃作用1 h,漂洗后滴加abc复合物,室温下40 min,用含体积分数为0.01%h2o2的dab溶液显色,常规脱水封片,光镜观察。阳性对照为正常sd大鼠肝组织切片与牙髓切片同步染色。阴性对照用正常血清稀释液替代一抗,其余与上述步骤相同。
2 结 果
8例正常牙髓组织il-6染色阴性,10例炎症牙髓组织il-6染色均为阳性,主要阳性表达细胞为单核—巨噬细胞、成纤维细胞和少量血管内皮细胞(见图)。
1 abc法染色,炎症人牙髓组织
2 abc法染色,正常人牙髓组织中il-6染色呈阳性(40×10)
中il-6组染色呈阴性(40×10)
3 讨 论
il-6是多种细胞分泌,能调节细胞功能的小分子多肽。近年来的研究表明,il-6是参与炎症反应和免疫应答的重要介质,在炎症病变中的作用已受到人们普遍关注。matsuki〔1〕采用原位杂交的方法,对正常和炎症性牙龈组织进行il-6 mrna的检测,结果表明:il-6 mrna可在炎症牙龈组织中的t细胞、b细胞、内皮细胞、成纤维细胞等多种细胞表达,而正常牙龈组织较少。 takahashi〔2〕 报道不仅炎症牙龈组织标本可见il-6 mrna表达,正常牙龈组织也有1/2表达,甚至更多。 在对il-6蛋白质水平表达的免疫组化研究中,发现il-6仅在炎症区域出现且主要定位于单核-巨噬细胞、 成纤维细胞、血管内皮细胞,而正常牙龈组织呈阴性。bartold〔3〕 还对培养的人牙龈成纤维细胞进行免疫组化染色,发现il-6定位在细胞膜表面和胞浆内。本组用鼠抗人il-6单克隆抗体通过免疫组化的方法,检测炎症和正常牙髓组织中il-6的表达,其结果与以上实验基本一致。正常牙髓组织中无il-6表达,炎症牙髓组织的单核-巨噬细胞、 成纤维细胞和少量血管内皮细胞il-6染色阳性。从组织学上证明了牙髓炎性渗出液中il-6的来源。本新闻共2页,当前在第1页12
责任编辑:韩晓炜
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