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转化生长因子β受体在体外培养的
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发表时间:2007-1-6 12:27:00
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关键词:受体;转化生长因子β;牙乳头;细胞;培养的
【摘要】 目的 探讨体外培养的人牙乳头细胞中转化生长因子β(transforming growth factor-β,tgf-β)受体的表达情况和外源性的tgf-β对人牙乳头细胞tgf-β受体的表达影响。方法 采用常规细胞培养、sp免疫组织化学及图像分析法,检测培养的人牙乳头细胞tgf-β受体的表达情况和外源性tgf-β对人牙乳头细胞tgf-β受体的表达影响。结果 tgf-βⅰ、ⅱ型受体为强阳性表达,ⅲ型受体为弱阳性表达。图像分析结果表明,各实验组与对照组灰度值经统计学分析差异无显著性(p>0.05)。结论 体外培养的人牙乳头细胞表达tgf-βⅰ、ⅱ、ⅲ型受体,外源性tgf-β不影响其受体表达水平。
the expression of tgf-β receptors on cultured human dental papilla cells
zhang ying, zhang yu, shi junnan.
(department of oral medicine,school of stomatology,the fourth military medical university,xi′an 710032, china)
【abstract】 objective to observe the expression of tgf-β receptors on cultured human dental papilla cells and the effects of tgf-β on tgf-β receptors of the cells.methods the expression of tgf-β receptors on cultured human dental papilla cells and the effects of tgf-β on tgf-β receptors of the cells were examined by cell culture and immunohistochemical technique and image analysis.results typeⅰ, typeⅱreceptors for tgf-β in human dental papilla cells were stained strongly and type ⅲ was weakly positive. image analysis indicated that all experimental groups had no obvious difference with control groups (p>0.05).conclusions cultured human dental papilla cells express tgf-β typeⅰ, typeⅱ and type ⅲ receptors. tgf-β has no obvious effects on the cell receptor expression.
【key words】 receptors,transforming growth factor beta; dental papilla; cells,cultured
转化生长因子β(transforming growth factor-β,tgf-β)是一族具有多种生物学功能的细胞因子,参与胚胎发育、损伤愈合、骨的重建以及免疫调节等生理和病理过程。其生物学作用是通过细胞膜表面的受体发挥的,已经发现有3种tgf-β受体,其中ⅰ、ⅱ型受体参与tgf-β的信号转导,ⅲ型受体不参与tgf-β信号转导,但能调节tgf-β与信号转导受体的结合。我们应用免疫组化方法检测人牙乳头细胞tgf-β受体表达情况和外源性tgf-β对体外培养的人牙乳头细胞tgf-β受体表达的影响,从而为体外进一步研究tgf-β及其受体在牙乳头细胞分化中的作用打下基础。
材料和方法
1.材料:dmem培养基(gibco u.s.a.);胎牛血清(hyclone u.s.a.);胰蛋白酶(gibco u.s.a.);tgf-β(第四军医大学口腔医学院病理科,蛋白含量为1 g/l,从牛血小板中提取);24孔培养板(gibco u.s.a.);co2孵箱(forma scientific u.s.a.);yj-875型超净工作台(苏州净化设备厂);tgf-β ⅰ、ⅱ、ⅲ型受体的多克隆抗体(武汉博士德公司),ⅰ、ⅱ、ⅲ型受体属特异性受体,不与其他细胞因子受体发生交叉反应;sp试剂盒(美国zymed公司) ;triton x-100(gibeo, u.s.a.);dab试剂盒(北京中山公司)。
2.细胞培养与标本制作:取生长良好的第6代人牙乳头细胞,用0.25%胰酶消化后,以2×104个/孔细胞浓度接种到24孔板中,每孔200 μl,将处理好的盖玻片预先放到24孔板中,待细胞爬满盖玻片80%后,将tgf-β以500、 5 000及50 000 μg/l的不同浓度加入培养液中,设对照组,培养72 h后取出盖玻片,4%多聚甲醛固定30 min,备用。本新闻共3页,当前在第1页123
责任编辑:姚红祥
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