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　细胞培养在牙科材料生物相溶性试      

发表时间：2007-1-6 12:27:00

更多保健方面的文章请到中国保健网>>     在目前使用的材料生物相溶性试验方法中，每种试验方法都基本上由三个部分组成，即生物系统、细胞-材料接触及生物学终点和相应的记录系统。 体外细胞培养试验作为一种初级快速毒性筛选程序，在牙科和其他医用材料的生物安全性评价中具有十分重要的地位［1］。与动物实验和人类临床研究相比较， 离体毒性试验的优点为：可控制的实验条件、较低的花费、快速完成和无伦理问题。牙科材料细胞毒性试验的局限主要是对于活体刺激的模拟不足，以及对于患者实际数据推测的困难。　　潜在生物危害的分析表明：牙科充填材料接触活性组织（如牙髓、牙本质和牙龈）一段较长的时期，材料中的渗出物或小颗粒可能被患者吞下。在国际的规定［2，3］中，关于这种危害检验，推荐了几种试验方法，包括关于局部反应的细胞毒性试验及基因毒性试验。这样，评价试验的选择首先应建立在对于潜在生物危害的分析上，第二步则必须决定采用哪种试验方法。 1　细胞毒性试验1.1　生物系统——细胞选择　　患者口腔充填材料所接触的从牙髓或牙龈来的不同靶细胞，其全部都有特定的功能。在充填材料的离体试验中采用永久细胞系：如l929或3t3鼠成纤维细胞或原代细胞（主要是牙龈、口腔粘膜和牙髓成纤维细胞是最常用的）［4］。　　永久细胞系可以说是相当简单的复制系统，但是它没有靶细胞在活体的特定新陈代谢势能。相反，原代细胞可以具有几乎完全象靶细胞的新陈代谢能力，因而，它们能较好的与活体状况相匹配［4］。然而， 永久细胞系和原代细胞（如牙龈细胞，牙周纤维细胞）在琼脂覆盖试验中， 有些原代细胞与永久细胞系相比有稍弱的敏感性趋势。但是，无论是永久细胞系还是原代细胞，琼脂覆盖试验所证明的主要影响是一样的［5］。因而，对于琼脂覆盖试验， 使用原代细胞并没有提供决定性的优势。这与eiskjaer和arenholt-bindslev 试验甲醛的报告结果相吻合。永久细胞系应该在口腔充填材料毒性检测的标准检验中作为首选的生物系统。这也是iso 10993(part 5)关于细胞培养标准的规定［3］。1.2　细胞－材料接触试验　　在患者体内，口腔充填材料可以与龈缘、牙髓或牙本质接触，其接触方式可以是直接接触，也可以通过玷污层间接接触。在离体试验中，直接细胞－材料接触方法在一定的条件下与活体状况近似，如牙髓暴露时。但在实验过程中还存在技术问题，如试验材料培养过程中的细菌污染，在大多数试验中无法既做到消毒又不使材料发生决定性变化或细胞机械损伤。在间接细胞－材料接触方法中使用琼脂、琼脂胶糖或醋酸纤维素滤纸，细胞层可以得到保护而不受细菌污染和机械损伤。但是，这些屏障对于活体状况的模拟并不能完全与活体状况一样［6］。　　tyas首先用牙本质作为细胞与实验材料间的屏障(barries)［7］，即将取材于人第三磨牙的牙本质切成薄片或使用经压制而成的牙本质片。但是，这些方法涉及到一些难题，因为可以利用的合适的人牙本质的数量是很有限的，牙本质薄片间存在的液体传导的差异很大，另外，压制形成的牙本质薄片，如tyas所用的和自然人的解剖结构并不一致。使用牛牙本质圆片，其可利用的数量几乎是无限的。细胞可以在这些圆片上生长，而且牛牙本质液体传导力与人的基本一样［8］。　　另一可选择作为细胞－材料接触的物质为洗出液。这些液体很容易控制，它们可以被离心或消毒过滤，且可与细胞直接接触。如mtt 比色法和细胞增殖度法等［9］。　　125i-udr释放法则是将材料直接加入靶细胞悬液中， 使二者接触一定时间后，测定受损细胞中释放的125i-udr脉冲数进行定量分析。此法可以弥补其他方法的一些不足之处(如材料与细胞不能直接接触，依靠肉眼观察评价细胞损伤情况，采用人工计数，缺少定时分析和客观的仪器测定等)。 该方法已被广泛应用于肿瘤免疫和基础免疫学研究，是评价牙科材料和生物材料细胞毒性的新方法［1］。本新闻共3页,当前在第1页123 责任编辑：姚红祥

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